Daftar Isi:

Mikroskop Fluoresensi dan Brightfield Murah: 9 Langkah (dengan Gambar)
Mikroskop Fluoresensi dan Brightfield Murah: 9 Langkah (dengan Gambar)

Video: Mikroskop Fluoresensi dan Brightfield Murah: 9 Langkah (dengan Gambar)

Video: Mikroskop Fluoresensi dan Brightfield Murah: 9 Langkah (dengan Gambar)
Video: Mikroskop Flouresensi 2024, Juli
Anonim
Image
Image
Mikroskop Fluoresensi dan Brightfield Murah
Mikroskop Fluoresensi dan Brightfield Murah
Mikroskop Fluoresensi dan Brightfield berbiaya rendah
Mikroskop Fluoresensi dan Brightfield berbiaya rendah

Proyek Fusion 360 »

Mikroskop fluoresensi adalah modalitas pencitraan yang digunakan untuk memvisualisasikan struktur spesifik dalam sampel biologis dan fisik lainnya. Objek yang menarik dalam sampel (misalnya neuron, pembuluh darah, mitokondria, dll.) divisualisasikan karena senyawa fluoresen hanya menempel pada struktur spesifik tersebut. Beberapa gambar mikroskop yang paling indah dikumpulkan dengan mikroskop fluoresensi; lihat gambar-gambar ini yang disajikan di halaman web Nikon MicroscopyU untuk melihat beberapa contoh. Mikroskop fluoresensi berguna untuk banyak studi biologi yang berfokus pada struktur atau tipe sel tertentu. Misalnya, banyak penelitian tentang neuron di otak bergantung pada penggunaan modalitas mikroskop fluoresensi yang secara khusus menggambarkan neuron.

Dalam instruksi ini, saya akan membahas prinsip-prinsip dasar mikroskop fluoresensi dan bagaimana membuat tiga mikroskop fluoresensi berbiaya rendah yang berbeda. Sistem ini biasanya menghabiskan biaya ribuan dolar, tetapi ada upaya baru-baru ini untuk membuatnya lebih mudah tersedia. Desain yang saya sajikan di sini menggunakan ponsel pintar, DSLR, dan mikroskop USB. Semua desain ini juga berfungsi sebagai mikroskop brightfield. Mari kita mulai!

Langkah 1: Ikhtisar Mikroskop Fluoresensi

Ikhtisar Mikroskop Fluoresensi
Ikhtisar Mikroskop Fluoresensi
Ikhtisar Mikroskop Fluoresensi
Ikhtisar Mikroskop Fluoresensi

Untuk memahami ide dasar mikroskop fluoresensi, bayangkan hutan lebat di malam hari yang dipenuhi pepohonan, hewan, semak, dan segala sesuatu yang hidup di hutan. Jika Anda menyorotkan senter ke hutan, Anda akan melihat semua struktur ini dan mungkin sulit untuk memvisualisasikan hewan atau tumbuhan tertentu. Katakanlah Anda hanya tertarik melihat semak blueberry di hutan. Untuk mencapai ini, Anda melatih kunang-kunang untuk tertarik hanya pada semak blueberry, sehingga hanya semak blueberry yang menyala ketika Anda melihat ke dalam hutan. Anda dapat mengatakan bahwa Anda memberi label semak blueberry dengan kunang-kunang sehingga Anda hanya dapat memvisualisasikan struktur blueberry di hutan.

Dalam analog ini, hutan mewakili seluruh sampel, semak blueberry mewakili struktur yang ingin Anda visualisasikan (misalnya sel tertentu atau organel subseluler), dan kunang-kunang adalah senyawa fluoresen. Kasus di mana Anda menyinari senter sendirian tanpa kunang-kunang dianalogikan dengan mikroskop medan terang.

Langkah selanjutnya adalah memahami fungsi dasar senyawa fluoresen (disebut juga fluorofor). Fluorofor adalah objek yang sangat kecil (pada skala nanometer) yang direkayasa untuk menempel pada struktur tertentu dalam sampel. Mereka menyerap cahaya pada rentang panjang gelombang yang sempit dan memancarkan kembali panjang gelombang cahaya lainnya. Misalnya, satu fluorofor dapat menyerap cahaya biru (yaitu fluorofor tereksitasi oleh cahaya biru) dan kemudian memancarkan kembali cahaya hijau. Biasanya ini diringkas oleh spektrum eksitasi dan emisi (gambar di atas). Grafik ini menunjukkan panjang gelombang cahaya yang diserap fluorofor dan panjang gelombang cahaya yang dipancarkan fluorofor.

Desain mikroskop sangat mirip dengan mikroskop brightfield normal dengan dua perbedaan utama. Pertama, cahaya untuk menerangi sampel harus panjang gelombang yang menggairahkan fluorofor (untuk contoh di atas, cahayanya biru). Kedua, mikroskop hanya perlu mengumpulkan cahaya emisi (lampu hijau), sementara menghalangi cahaya biru. Ini karena cahaya biru pergi ke mana-mana tetapi lampu hijau hanya datang dari struktur tertentu dalam sampel. Untuk menghalangi cahaya biru, mikroskop biasanya memiliki sesuatu yang disebut filter longpass yang memungkinkan cahaya hijau masuk tanpa cahaya biru. Setiap filter longpass memiliki panjang gelombang cutoff. Jika cahaya memiliki panjang gelombang lebih panjang dari cutoff, maka dapat melewati filter. Oleh karena itu namanya, "longpass." Panjang gelombang yang lebih pendek diblokir.

Berikut adalah beberapa ikhtisar mikroskop fluoresensi:

bitesizebio.com/33529/fluorescence-microsc…

www.microscopyu.com/techniques/fluorescenc…

www.youtube.com/watch?v=PCJ13LjncMc

Langkah 2: Pemodelan Mikroskop Dengan Optik Sinar

Mikroskop Pemodelan Dengan Optik Sinar
Mikroskop Pemodelan Dengan Optik Sinar
Mikroskop Pemodelan Dengan Optik Sinar
Mikroskop Pemodelan Dengan Optik Sinar

Runner Up dalam Kontes Optik

Direkomendasikan: